Тхе Имуноелектрофореза користи се за лабораторијску дијагностику откривања моноклонских антитела у крви пацијента. Моноклонска антитела су изведена из исте ћелије и усмерена су против истих антигена. Из тог разлога треба их оценити као патолошке и, ако се докажу, говорити о болестима као што је Валденстромова болест.
Шта је имуноелектрофореза?
Имуноелектрофореза се користи за лабораторијску дијагностику откривања моноклонских антитела у крви пацијента.Иони имају различиту покретљивост. Ова различита мобилност чини основу електрофорезе. Ове методе раздвајају различите супстанце једна од друге користећи електрична поља и гравитацију. Добро позната метода на терену је имуноелектрофереза.
Ово је квалитативна дијагностичка метода која се користи за откривање моноклонских антитела. Антитела су имунолошки активне протеинске супстанце из одређене ћелијске линије. Моноклонска антитела се заснивају на истим Б лимфоцитима и због тога су усмерена против једног епитопа. Сваки природни имуни одговор на инвадирајуће антигене одговара поликлоналном одговору и стога је усмерен против различитих епитопа. Моноклонски имуни одговор стога даје индикације патолошких телесних процеса.
Моноклонска антитела везују различите молекуле високе специфичности. Ово везивање се може доказати имуноелектрофорезом. Процедура је квалитативни поступак у лабораторијској дијагностици и састоји се од две врсте поступка, електрофореза серума и имунодифузија.
Функција, ефекат и циљеви
Имуноелектрофореза комбинује методологију електрофорезе серума са имунодифузијом. Пацијентов серум се поставља на филм агарозног гела или целулозне ацетатне фолије. Такође се примењује контролни серум. Након апликације следи електрофоретско одвајање узорака. Антисера, ИгГ, ИгА, ИгМ, сирћетна киселина за нормалну електрофорезу и каппа и ламбда се примењују између разводних линија.
Ово ствара реакцију са антителима у пацијентовом серуму, што ствара линије таложења. У зависности од коришћеног антисерума и положаја и облика појединих линија, могу се извући закључци о имуноглобулину који се налазе у лаким ланцима каппа или ламбда. У случају ламбда појаса, постоје лаки лаки ланци сачињени од антитела. Лабораторија пружа додатне доказе путем ретких ИгЕ и ИгД, што омогућава тачно одређивање имуноглобулина. Метод имунодифузијске електрофорезе одвија се према Пиерре Грабар и Цуртис Виллиамс и одговара комбинацији електрофорезе гела агарозе протеина и дифузије антитела.
Прво се одвија електрофореза агарозног гела. Након тога, садржана антитела дифундирају у односу на антигене и стварају лукове талога. То треба разликовати од ракетне имуноелектрофорезе према Лаурелл-у, што одговара електрофорези протеина у агарозном гелу, а свако од њих има антитела у одређеној концентрацији. У гелу постоји мало базични пуфер, који само дозвољава миграцији антигена и који гура већину антитела на изоелектричну тачку излагањем благо базичној пХ вредности, све док се не престану електрофоретски кретати.
На почетку ракетне имуноелектрофорезе постоји вишак антигена, тако да се формирају растворљиви комплекси антиген-антитела. Током електрофорезе такође постоји везивање између антигена и других антитела. На овај начин се формирају имунопреципитати у тачки еквиваленције, који подсећају на фигуре ракета сличне висини пропорционалној концентрацији антигена. За процену теста мери се висина талога.
Овде можете пронаћи лекове
➔ Лекови за јачање одбрамбеног и имуног системаРизици, нуспојаве и опасности
Откривање моноклонских антитела је од посебног значаја за дијагнозу мултиплог мијелома и Валденстромове болести. Достављени докази говоре о малигној дегенерацији имуних ћелија. Мултипли мијелом одговара карциному коштане сржи, за који је карактеристично злоћудно множење ћелија које производе антитела у плазми.
Ове плазма ћелије производе антитела и њихове фрагменте. Малигне ћелије плазме увек потичу из заједничке ћелије претходнице и зато су генетски идентичне. Они производе само моноклонска антитела. Малигност ове болести може одговарати преканцерозном стадијуму, али може достићи и високо малигни стадијум, који без лечења брзо може бити смртоносан. Симптоми болести су последица малигног раста ћелија или антитела и фрагмената антитела. Најчешћи симптоми укључују бол у костима, отапање костију и спонтане преломе.
Ниво калцијума у крви се често повећава. Поред тога, ненормална антитела се често таложе у ткиву и узрокују функционалне поремећаје у органима, што може довести до симптома као што су затајење бубрега или поремећен проток крви. Валдстромова болест је такође и злоћудна туморска болест. Прецизније, ради се о малигној болести лимфома која се убраја у споро прогресивне и готово асимптоматске Б-ћелијске не-Ходгкинове лимфоме. У већини случајева код ове болести може се открити ненормална производња моноклонског ИгМ услед активности малигних ћелија лимфома.
Валденстромова болест је по својствима изузетно слична мултиплом мијелому, али обично показује повољнији ток. Већина пацијената са Валденстромовом болешћу углавном је асимптоматска већ у тренутку када им се дијагностикује. Други пацијенти рано показују симптоме, као што су неспецифични умор или периферне неуропатије, који су узроковани таложењем моноклонског ИгМ-а унутар мијелинског омотача. Чак и мале количине ИгМ могу покренути полинеуропатију. Код других пацијената се не јавља полинеуропатија, чак ни на високом нивоу. Поред тога, могу се јавити неспецифични симптоми попут врућице, нежељеног губитка тежине или ноћног знојења. Бол у костима је такође карактеристична.
Због прекомерне производње ИгМ, крв постаје хипервискозна, тако да наведени симптоми могу бити повезани са симптомима хипервискозног синдрома. У већини случајева, ова тенденција крварењима манифестује се честим крварењима из носа, главобољом, општим лошим или замагљеним видом и звучним тегобама. Да би се откриле злоћудне болести овог типа, имуноелектрофереза је одавно постала стандардни дијагностички поступак.