Преференцијална дијагностика

Тхе Преференцијална дијагностика нуди могућност генетског испитивања женских јајних ћелија као део ин витро оплодње (ИВФ). Прегледи се врше на хромозомима првог и другог поларног тела, који настају током 1. и 2. мејозе након уношења мушке сперме у јајну ћелију. Предност ове методе је у томе што се не ради о пре-имплантацијској дијагнози (ПГД), јер се испитивање врши пре него што се споји женско и мушко језгро, тако да је дијагноза фаворитизације дозвољена у неким земљама у којима је ПГД забрањен.

Шта је дијагностика преферирања?

Дијагностика преферирања омогућава откривање хромосомских аберација у хаплоидном геному женске јајне ћелије у контексту ин витро оплодње (ИВФ). Пре свега, могу се открити бројчана одступања одређених хромозома (анеуплоидија) и абнормалности одређених гена који узрокују наследне болести. Када се мушки сперматозоид уведе у цитоплазму јајне ћелије током ИВФ-а, покреће се прва и друга мејоза (мејоза И и ИИ) јајета.

Подела ствара две "сувишне" ћелије, поларна тела, која имају исти скуп хромозома као и сама јајна ћелија. Поларна тела, која би тело нормално разграђивало, биопсијом поларног тела узимају се за испитивање хромозома. Пошто се дијагностика преферентизације увек спроводи на поларним телима, поступак се назива и дијагностика поларног тела (ПКД). Предност методе испитивања је у томе што се може извести и у неким земљама у којима је забрањена пре-имплантациона дијагноза (ПГД), јер се испитивање врши на геному јајне ћелије када се ћелијска језгра сперматозоида и јајна ћелија још нису спојила.

Недостатак је тај што се могу прегледати само хромозомске аберације мајчиног генома. Хромозоми сперме који су унесени у цитоплазму јајета не могу се открити овом методом. Болести повезане са И не могу се препознати јер скуп хаплоидних хромозома јајне ћелије не може садржавати И-хромосом.

Функција, ефекат и циљеви

Као део дијагнозе пре оплодње у облику испитивања генетског поларног тела, нумеричке аномалије (анеуплоидија) могу се открити у одређеним хромозомима материнског генома, као и транслокације у којима су сегменти хромозома одвојени и реинтегрисани на погрешном месту. Поред тога, могу се дијагностицирати мутације гена повезаних са Кс које се наслеђују од мајке и засноване су на мутацији једног гена (моногенска болест). Ово претпоставља да мора бити позната потенцијална наследна болест да би се могао посебно испитивати одређени ген на Кс хромозому.

У случају рецесивног наследства, постоји шанса да Кс хромозом полног тела - а самим тим и Кс хромозом оплођене јајне ћелије, садржи здрави алел одговарајућег гена. Сам поступак укључује биопсију поларног тела у којој се два хаплоидна поларна тела уклањају из јајне ћелије, а хромозоми се затим подвргавају ФИСХ тесту (флуоресценција ин ситу хибридизација). Биопсија поларних тела представља огроман изазов за лабораторију која изводи тај посао јер идентификација и изолација поларних тела захтева одређено искуство. За поступак ФИСХ теста доступне су такозване ДНК пробе за одабране хромозоме, који се повезују на одговарајуће хаплоидне хромозоме јер имају комплементарни низ аминокиселина.

ДНК сонде су обележене различитим флуоресцентним бојама, тако да се хромозоми могу препознати уз помоћ посебног софтвера и рачунати у аутоматском процесу. Већина хромосомских аберација попут анеуплоидија и померања хромозома унутар хромозома су смртоносне. То значи да ИВФ или не формира зиготу, или да се ембрион одбацује након трансплантације у материцу, или да долази до раног или каснијег побачаја. Пошто се учесталост кромосомских аберација у јајним ћелијама жена повећава с годинама, важан циљ дијагностике преферирања је позитиван избор оплођених јајашаца. У материцу се трансплантирају само оплођена јајашца са - колико је препознатљиво - нетакнутим геномом.

Каже се да позитивна селекција повећава стопу трудноће након ИВФ-а и смањује број одбачених оплођених јајашаца и број побачаја. Други циљ је искључење наследних болести заснованих на аберацијама хромозома или одређеним генетским оштећењима на оплођеном оплођеном јајету од самог почетка позитивном селекцијом оплођених јајашаца. Типичне наследне болести које се могу искључити тестом су цистична фиброза, атрофија мишића кичме и анемија српастих ћелија.

Ризици, нуспојаве и опасности

Дијагностика преферирања се врши ван тела и зато не укључује никакве додатне физичке ризике за дотичну жену. Постоји само мали ризик од физичких повреда и инфекција повезаних са уклањањем јаја. За разлику од ПГД-а, који такође обухвата испитивање хромозома помоћу ФИСХ теста, дијагноза пре оплодње може прегледати само хромозом и генетски материјал од мајке.

То значи да негативан ФИСХ тест, у коме нису дијагностиковане кромосомске или генетске аберације, може побудити претјерано позитивна очекивања родитеља у погледу трудноће и накнадног порођаја. Хромосомске аберације очинског генома и евентуално постојеће аномалије И хромозома, које могу изазвати полно-наследну болест, нису забележене. У том погледу, дијагностика преферентизације је још непотпунија од ПГД-а, у којој се може прегледати целокупни геном ембриона у фази бластуле.

Међутим, чак и са негативним ПГД-ом, не може се искључити да постоје генске оштећења у геному ембриона која могу узроковати нежељене догађаје и евентуална оштећења након рођења. ФИСХ тест може се икада односити само на одабране хромозоме и гене.